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一种构建链特异RNA文库的方法及应用

基本信息

申请号 CN201811055627.1 申请日 -
公开（公告）号 CN109234813B 公开（公告）日 2021-11-16
申请公布号 CN109234813B 申请公布日 2021-11-16
分类号 C40B50/06（2006.01）I;C12Q1/6869（2018.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I 分类 组合技术〔8〕;
发明人 卢文翔;王莹;涂慧珍;白云飞;顾万君;朱毅华;郑卫国 申请（专利权）人 南京迪康金诺生物技术有限公司
代理机构 南京经纬专利商标代理有限公司 代理人 蓝霞
地址 211102江苏省南京市江宁区诚信大道1788号中致科技平台3层301室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种新的构建链特异RNA文库的方法，尤其涉及一种构建链特异RNA文库的方法及应用。该方法将RNA片段化处理得到片段化的RNA，将片段化的RNA逆转录后采用RNase H消化RNA/DNA杂合体，消化产物与接头连接得到连接产物，连接产物进行PCR扩增，扩增产物即为链特异RNA文库。本发明采用RNase H消化RNA/DNA杂合体后，直接进行双端接头连接，得到链特异性RNA文库；同时优化的反应体系使得从样品RNA到接头连接完成只需在一管中顺次加入反应试剂即可进行。与常规链特异性RNA文库构建方法相比，克服了技术的复杂性与繁琐性，节省了大量人力、时间与试剂成本。