一种原核表达细胞及其制备方法和应用
基本信息
| 申请号 | CN202010659296.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111705032A | 公开（公告）日 | 2020-09-25 |
| 申请公布号 | CN111705032A | 申请公布日 | 2020-09-25 |
| 分类号 | C12N1/21(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 高乐;王壹;张昊;栗慧超;于源华;宋禹 | 申请（专利权）人 | 科赫生物科技（北京）有限公司 |
| 代理机构 | 北京悦和知识产权代理有限公司 | 代理人 | 司丽春 |
| 地址 | 100000北京市大兴区生物医药基地春林大街16号四层 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明实施例涉及一种原核表达细胞及其制备方法和应用，该原核表达细胞能共表达肝素酶I HepA’和分子伴侣素CpkA。肝素酶I HepA’的氨基酸序列中，关键是用带净正电荷的信号标签肽取代HepA中前导肽氨基酸序列。改造后的含有一段带净正电荷的信号标签肽的肝素酶I HepA’在原核表达细胞中的表达量大大提高，尤其是存在于上清液中的蛋白量大大提高；同时由于CpkA的羧基端带净负电荷，其与带净正电荷的信号标签肽产生静电相互作用，使得CpkA和HepA’结合力更强，因此CpkA可以更有效地帮助HepA’折叠成正确的构象，从而提高其可溶性表达。 |
