一种恶臭假单胞菌细胞色素P450环氧酶突变体及其应用

基本信息

申请号 CN202111599580.7 申请日 -
公开(公告)号 CN114214293A 公开(公告)日 2022-03-22
申请公布号 CN114214293A 申请公布日 2022-03-22
分类号 C12N9/02(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P17/02(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 刘立明;燕宇;宋伟;陈修来;刘佳;高聪 申请(专利权)人 无锡阿科力科技股份有限公司
代理机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 代理人 赵巧娜
地址 214122江苏省无锡市锡山区民祥路29号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种恶臭假单胞菌细胞色素P450环氧酶突变体及其应用,属于生物工程技术领域。本发明通过对来源于恶臭假单胞菌的细胞色素P450环氧酶进行改造,克服了之前野生型的酶因为过氧化氢逸散和酸醇对质子转化率低而导致的催化效率低的局限,最终得到最佳突变体Q6(PpCytPA250V/T255E/S296V/A297P/P298N),以此突变体为催化剂,以降冰片烯为底物,转化后10mL规模摇瓶产量为72.05g/L,摩尔产率为61.59%,单位菌体生产环氧降冰片烷的能力为3.6g/g,几乎不产生羟基化副产物。因此大大降低了之前的高菌体量以及繁复的后期分离纯化过程,为环氧降冰片烷的工业化生产和绿色生产奠定了基础。