一种表达木酮糖激酶基因的质粒的构建方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种表达木酮糖激酶基因的质粒的构建方法

基本信息

申请号	CN200810064831.X	申请日	-
公开（公告）号	CN101302535B	公开（公告）日	2010-10-20
申请公布号	CN101302535B	申请公布日	2010-10-20
分类号	C12N15/66(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	平文祥;葛菁萍;凌宏志;宋刚;杜春梅;赵丹;高冬妮;曹喜生	申请（专利权）人	南通国邦科技发展有限公司
代理机构	哈尔滨市松花江专利商标事务所	代理人	单军
地址	150080 黑龙江省哈尔滨市南岗区学府路74号
法律状态	-

摘要

一种表达木酮糖激酶基因的质粒的构建方法，它涉及一种质粒载体的构建方法。它解决了目前经代谢工程改造后的酿酒酵母木糖利用率仍然很低，且发酵副产物木糖醇产生量高的问题。构建方法：先克隆KanR基因、XKS1基因、ADH1终止子片段、酿酒酵母中2.2kb?rDNA片段；然后回收、纯化基因片段与pGEMT?Easy载体连接；再依次构建质粒pR、质粒pRK和质粒pRKT；最后将2.2kb?rDNA片段加入质粒pRKT。本发明方法所构建的载体可以将XKS1基因高拷贝整合到酿酒酵母的染色体基因组上，实现XKS1的超量稳定表达，疏通了酿酒酵母利用木糖产乙醇的木糖代谢流，提高了木糖的利用率，降低了副产物木糖醇的产量。