一种表达木糖还原酶基因的质粒的构建方法

基本信息

申请号 CN200810064829.2 申请日 -
公开(公告)号 CN101302533B 公开(公告)日 2010-09-08
申请公布号 CN101302533B 申请公布日 2010-09-08
分类号 C12N15/66(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 平文祥;葛菁萍;凌宏志;杜春梅;宋刚;赵丹;高冬妮;于新 申请(专利权)人 南通国邦科技发展有限公司
代理机构 哈尔滨市松花江专利商标事务所 代理人 单军
地址 150080 黑龙江省哈尔滨市南岗区学府路74号
法律状态 -

摘要

摘要 一种表达木糖还原酶基因的质粒的构建方法,它涉及一种质粒载体的构建方法。它解决了酿酒酵母中缺少木糖还原酶,不具备木糖代谢能力,不能有效发酵植物纤维水解液的问题。构建方法:先克隆XYL1基因、ADHt基因序列和KanR基因;再回收、纯化步骤一至三制备的基因片段,分别与载体连接;然后构建质粒pADH、质粒pAK;再将XYL1基因引入质粒pAK,即得到表达木糖还原酶基因的质粒。本发明方法将木糖还原酶基因XYL1和乙醇脱氢酶的强启动子的终止子序列构建于同一个质粒载体上,在增添了木糖代谢为乙醇的途径外,还抑制了木糖代谢为木糖醇,能够介导酿酒酵母高效代谢木糖生产乙醇。