布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶的制备方法
基本信息
| 申请号 | CN200910056686.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN101633915B | 公开（公告）日 | 2011-06-08 |
| 申请公布号 | CN101633915B | 申请公布日 | 2011-06-08 |
| 分类号 | C12N9/00(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 姚璎;杲光伟;李大伟 | 申请（专利权）人 | 泰州新生源生物医药有限公司 |
| 代理机构 | 上海交达专利事务所 | 代理人 | 上海交通大学;泰州新生源生物医药有限公司 |
| 地址 | 200240 上海市闵行区东川路800号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 一种生物技术领域的酶的布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶的制备方法，具体步骤如下：分别设计引物，扩增布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶的α亚基和β亚基基因；将α亚基和β亚基基因分别克隆到原核表达载体pET21a(+)中，构建pET21a(+)-PheRSα及pET21a(+)-PheRSβ表达载体；将α亚基的操纵子亚克隆到pET21a(+)-PheRSβ中，形成重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ；将重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ转化大肠杆菌BL21(DE3)RIPL中，IPTG诱导表达；收集裂解后的菌液上清，纯化蛋白，得布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶。本发明构建布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶(PheRS)的重组质粒，表达纯化出布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶蛋白，为抗寄生虫药物的筛选奠定了基础。 |
