一种单碱基突变方法及采用的系统
基本信息
| 申请号 | CN202110782625.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113403342A | 公开（公告）日 | 2021-09-17 |
| 申请公布号 | CN113403342A | 申请公布日 | 2021-09-17 |
| 分类号 | C12N15/85（2006.01）I;C12N15/113（2010.01）I;C12N15/10（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 包煜贤 | 申请（专利权）人 | 珠海舒桐医疗科技有限公司 |
| 代理机构 | 苏州创元专利商标事务所有限公司 | 代理人 | 汪青;周敏 |
| 地址 | 519000广东省珠海市横琴新区粤澳合作中医药科技产业园豆蔻路36号2栋404室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种单碱基突变方法及采用的系统，针对欲突变基因的点突变位点设计sgRNA并构建CRISPR/Cpf1质粒；截取欲突变成基因的突变点附近的碱基序列，并在碱基序列中引入无义突变合成donor1；将CRISPR/Cpf1质粒和donor1共转染含有欲突变基因的细胞得到含有无义突变的细胞；针对含有无义突变的细胞中的含有无义突变的序列的点突变位点设计Re‑sgRNA并构建Re‑CRISPR/Cpf1质粒；截取欲突变成基因的突变点附近的碱基序列合成donor2；将Re‑CRISPR/Cpf1质粒和donor2共转染含有无义突变的细胞得到含有欲突变成基因的细胞。本发明能够达到无痕修复的目的。 |
