一种准确的可批量进行体内在靶活性评估及脱靶检测的方法
基本信息
| 申请号 | CN202011261285.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112501252A | 公开（公告）日 | 2021-03-16 |
| 申请公布号 | CN112501252A | 申请公布日 | 2021-03-16 |
| 分类号 | C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/6806(2018.01)I;C12Q1/6869(2018.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 谢红娴;兰凯;程欢欢;黄龙 | 申请（专利权）人 | 珠海舒桐医疗科技有限公司 |
| 代理机构 | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 | 代理人 | 岳泉清 |
| 地址 | 519000广东省珠海市横琴新区兴盛一路128号珠海富力中心17层1721号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 一种准确的可批量进行体内在靶活性评估及脱靶检测的方法，本发明涉及一种准确的可批量进行体内在靶活性评估及脱靶检测的方法。本发明的目的是为了解决现有检测sgRNA的在靶活性与脱靶效应的方法复杂，准确性低的问题，本发明基于体内脱靶检测GUIDE‑seq开发了高通量的细胞内脱靶检测手段。具体方法为：1.针对目标基因设计sgRNA；2.合成sgRNA文库；3.将sgRNA文库克隆到带有SpCas9表达蛋白的质粒上；4.文库细胞转染；5.GUIDE‑seq建库测序。本发明检测结果更加精确，文库大大减小，在保证检测准确性的同时大大减少实验的复杂性，本发明应用于体内在靶活性评估及脱靶检测领域。 |
