CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系中的应用

基本信息

申请号 PCT/CN2019/114155 申请日 -
公开(公告)号 WO2021051484A1 公开(公告)日 2021-03-25
申请公布号 WO2021051484A1 申请公布日 2021-03-25
分类号 C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 NIU, DONG;牛冬;WANG, TAO;汪滔;WANG, DEHUA;王德华;WANG, LEI;王磊;CHENG, RUI;程锐;ZENG, WEIJUN;曾为俊;MA, XIANG;马翔 申请(专利权)人 南京启真基因工程有限公司
代理机构 - 代理人 HEXIN INTELLECTUAL PROPERTY FIRM;杭州合信专利代理事务所(普通合伙)
地址 Building 6, No. 17, Huashan Road, Economic Development Zone Of Gaochun District,Nanjing, Jiangsu 211306 CN
法律状态 -

摘要

摘要 CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系中的应用,针对猪HBA和HBB基因各设计了一对靶点序列,利用该两对靶点序列构建了三种CRISPR/Cas9系统,每种CRISPR/Cas9系统均包括gRNA载体和Cas9表达载体;将该三种CRISPR/Cas9系统中的表达载体按比例分别转入猪成纤维细胞,筛选得到α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系。通过基因编辑技术在猪原代成纤维细胞中对猪HBA、HBB基因分别造成单基因突变及联合基因突变,得到HBA、HBB、HBA&HBB基因突变细胞。