CRISPR系统及其在构建GABRG2基因突变的克隆猪核供体细胞中的应用

基本信息

申请号 CN202011520146.0 申请日 -
公开(公告)号 CN112899306A 公开(公告)日 2021-06-04
申请公布号 CN112899306A 申请公布日 2021-06-04
分类号 C12N15/85;C12N15/113;C12N5/10;C12N9/22;A01K67/027 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 牛冬;汪滔;陶裴裴;曾为俊;刘瑜;王磊;程锐;赵泽英;马翔;黄彩云 申请(专利权)人 南京启真基因工程有限公司
代理机构 南京天华专利代理有限责任公司 代理人 傅婷婷;徐冬涛
地址 211306 江苏省南京市高淳区经济开发区花山路17号6幢南京健康产业研究院3楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种CRISPR系统及其在构建GABRG2基因突变的克隆猪核供体细胞中的应用。一种用于猪GABRG2基因编辑的CRISPR/cas9系统,包含序列如SEQ ID NO.2所示的Cas9高效表达载体pKG‑GE3和针对猪GABRG2基因的gRNA表达载体,该载体以序列如SEQ ID NO.3所示的pKG‑U6gRNA为载体骨架,表达序列如SEQ ID NO.35所示的gRNA。采用本发明筛选的gRNA联合改造的Cas9高效表达载体进行基因编辑,编辑效率比原载体有了显著的提高。