CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系中的应用
基本信息
申请号 | CN201910890978.2 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN112538497A | 公开(公告)日 | 2021-03-23 |
申请公布号 | CN112538497A | 申请公布日 | 2021-03-23 |
分类号 | C12N15/113(2010.01)I;C12N9/22(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/90(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 牛冬;汪滔;王德华;王磊;程锐;曾为俊;马翔 | 申请(专利权)人 | 南京启真基因工程有限公司 |
代理机构 | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人 | 解明铠 |
地址 | 211306江苏省南京市高淳区经济开发区花山路17号6幢 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系中的应用,针对猪HBA和HBB基因各设计了一对靶点序列,利用该两对靶点序列构建了三种CRISPR/Cas9系统,每种CRISPR/Cas9系统均包括gRNA载体和Cas9表达载体;将该三种CRISPR/Cas9系统中的表达载体按比例分别转入猪成纤维细胞,筛选得到α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系。本发明通过基因编辑技术在猪原代成纤维细胞中对猪HBA、HBB基因分别造成单基因突变及联合基因突变,得到HBA、HBB、HBA&HBB基因突变细胞。 |
