CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系中的应用

基本信息

申请号 CN201910890978.2 申请日 -
公开(公告)号 CN112538497A 公开(公告)日 2021-03-23
申请公布号 CN112538497A 申请公布日 2021-03-23
分类号 C12N15/113(2010.01)I;C12N9/22(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/90(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 牛冬;汪滔;王德华;王磊;程锐;曾为俊;马翔 申请(专利权)人 南京启真基因工程有限公司
代理机构 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙) 代理人 解明铠
地址 211306江苏省南京市高淳区经济开发区花山路17号6幢
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了CRISPR/Cas9系统及其在构建α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系中的应用,针对猪HBA和HBB基因各设计了一对靶点序列,利用该两对靶点序列构建了三种CRISPR/Cas9系统,每种CRISPR/Cas9系统均包括gRNA载体和Cas9表达载体;将该三种CRISPR/Cas9系统中的表达载体按比例分别转入猪成纤维细胞,筛选得到α、β和α&β地中海贫血模型猪细胞系。本发明通过基因编辑技术在猪原代成纤维细胞中对猪HBA、HBB基因分别造成单基因突变及联合基因突变,得到HBA、HBB、HBA&HBB基因突变细胞。