用于构建双基因联合敲除的动脉粥样硬化猪核移植供体细胞的CRISPR系统及其应用

基本信息

申请号 CN202110065732.9 申请日 -
公开(公告)号 CN113046388A 公开(公告)日 2021-06-29
申请公布号 CN113046388A 申请公布日 2021-06-29
分类号 C12N15/85;C12N15/12;C12N5/10;C12N15/877;A01K67/027 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 牛冬;汪滔;马翔;刘璐;曾为俊;王磊;程锐;赵泽英;陶裴裴;黄彩云 申请(专利权)人 南京启真基因工程有限公司
代理机构 南京天华专利代理有限责任公司 代理人 傅婷婷;徐冬涛
地址 211306 江苏省南京市高淳区经济开发区花山路17号6幢南京健康产业研究院3楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种用于猪APOE和LDLR基因编辑的CRISPR/Cas9系统,包含Cas9表达载体和针对猪APOE和LDLR基因的gRNA表达载体;所述的Cas9表达载体为质粒全序列如SEQ ID NO.2所示的pU6gRNA‑eEF1a‑mNLS‑hSpCas9‑EGFP‑PURO载体。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,将猪的APOE和LDLR基因敲除,制备出APOE和LDLR基因双敲除的猪重组细胞,为进一步的通过体细胞克隆技术生产动脉粥样硬化克隆猪奠定坚实基础,进而为动脉粥样硬化疾病的治疗及发病机制的研究提供有力的实验工具。