一种通过扩增16S rDNA保守区序列检测细菌的方法
基本信息
| 申请号 | CN201811631519.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN109554441A | 公开（公告）日 | 2019-04-02 |
| 申请公布号 | CN109554441A | 申请公布日 | 2019-04-02 |
| 分类号 | C12Q1/6851（2018.01）I; C12Q1/689（2018.01）I; C12Q1/14（2006.01）I; C12Q1/10（2006.01）I; C12Q1/04（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 赵简; 雷颖; 白志慧; 张守梅 | 申请（专利权）人 | 上海思济细胞技术中心（有限合伙） |
| 代理机构 | 上海骁象知识产权代理有限公司 | 代理人 | 同济大学; 上海思济细胞技术中心（有限合伙） |
| 地址 | 200092 上海市杨浦区四平路1239号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 一种通过扩增16S rDNA保守区序列检测细菌的方法，利用RT‑PCR方法扩增细菌16S rDNA的保守区序列，标准品为含有16S rDNA部分保守区序列的pUC57质粒，在PCR反应体系中含有200nM正向引物，200nM反向引物，再加入适量模板，通过含有16S rDNA部分保守区序列的pUC57质粒建立标准曲线，再根据待检测样本的CT值来计算细菌的浓度。本发明方法在阈值设定在10000时，待检测样本CT值<35，且Tm在83.6℃‑85℃之间为细菌污染，能检测的大肠杆菌浓度极限在3‑33cfu/μl之间，能检测的DNA拷贝数极限在1.6×102copies左右，2h即可得出结果。 |
