一种一步法合成L-肌肽的方法及截短的L-肌肽合成酶
基本信息
申请号 | CN201910041416.0 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN109851658B | 公开(公告)日 | 2019-06-07 |
申请公布号 | CN109851658B | 申请公布日 | 2019-06-07 |
分类号 | C07K5/062(2006.01)I; | 分类 | 有机化学〔2〕; |
发明人 | 朱益波;王明崇;陈颖;武国寒;高桂兰;赵成相 | 申请(专利权)人 | 苏州百因诺生物科技有限公司 |
代理机构 | 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 滕诣迪 |
地址 | 215400 江苏省苏州市太仓市沙溪镇昭溪路98号1幢、2幢 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种一步法合成L‑肌肽的方法及截短的L‑肌肽合成酶,该方法以β‑丙氨酸、L‑组氨酸、ATP和聚磷酸盐为原料,MgCl2为激活剂,加入L‑肌肽合成酶和聚磷酸盐激酶,在pH 6.5‑8.5,30‑45℃温度条件下通过酶促反应偶联催化合成肌肽;本发明利用大肠杆菌分别表达截短的L‑肌肽合成酶(其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示)和聚磷酸盐激酶,经纯化后混合形成双酶偶联体系,截短表达的L‑肌肽合成酶催化β‑丙氨酸和L‑组氨酸合成L‑肌肽,同时伴随着ATP去磷酸化形成ADP,聚磷酸盐激酶则催化聚磷酸盐转磷酸基团给ADP形成ATP,从而实现ATP的循环再生;利用双酶偶联体系,在合适的反应条件下反应得到肌肽;本发明的方法具有原料价格低廉、酶转化时间短、操作简便以及生产成本低等优点。 |
