直接重编程小鼠肝细胞为胰岛β细胞的方法及应用

基本信息

申请号 CN201510400183.0 申请日 -
公开(公告)号 CN105002142A 公开(公告)日 2015-10-28
申请公布号 CN105002142A 申请公布日 2015-10-28
分类号 C12N5/10(2006.01)I;C12N5/071(2010.01)I;C07K14/62(2006.01)I;A61K38/28(2006.01)I;A61K35/39(2015.01)I;A61P3/10(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 李富荣;齐晖;邓春艳;张田田 申请(专利权)人 深圳市诺亚起航生物科技有限公司
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 关畅;白艳
地址 518020 广东省深圳市东门北路1017号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了直接重编程小鼠肝细胞为胰岛β细胞的方法及应用。本发明提供了一种使肝细胞重编程为胰岛β细胞的方法,包括如下步骤:将Pdx1蛋白编码基因、Pax4蛋白编码基因和Neurod1蛋白编码基因转染离体肝脏细胞,得到胰岛β细胞;本发明的优势在于,第一,采用非病毒EntransterTM-D转染试剂,不但具有较高的转染效率,同时大大提高了直接重编程过程中转染的安全性。第二,根据文献的报道,筛选出适用于直接重编程为胰岛β细胞新的最佳转染组合Pdx1、Pax4、Neurod1。第三,根据各个转录因子发挥作用的先后顺序,筛选出最佳转染时段24h,从而提高了直接重编程为胰岛细胞的成熟度问题,本研究中重编程效率达23%。