一种利用原核表达系统表达纯化多肽的方法

基本信息

申请号 CN202010786828.X 申请日 -
公开(公告)号 CN112029788A 公开(公告)日 2020-12-04
申请公布号 CN112029788A 申请公布日 2020-12-04
分类号 C12N15/70;C12P21/06;C07K7/06;C12R1/19 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 郭伟 申请(专利权)人 江苏亨瑞生物医药科技有限公司
代理机构 杭州天正专利事务所有限公司 代理人 黄美娟;李世玉
地址 225306 江苏省泰州市海陵区东方温莎小镇19栋301
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种利用原核表达系统表达纯化多肽的方法,所述方法为:将多肽单元的C端加上肠激酶酶切位点,N端加上组氨酸标签,获得重组多肽单元;然后从N端到C端依次将若干个重组多肽单元串联,获得重组蛋白的氨基酸序列;将重组蛋白的编码基因导入大肠杆菌,构建重组大肠杆菌;重组大肠杆菌诱导表达后,湿菌体用缓冲液重悬破碎后,提取重组蛋白;重组蛋白采用肠激酶处理后,获得多个多肽单元。本发明通过在要表达的短肽之间加上肠激酶的酶切位点,利用肠激酶处理最后可以保证得到大小和序列统一的目的短肽,有效的克服了无法利用原核系统表达多肽的难题。