一种利用原核表达系统表达纯化多肽的方法
基本信息
申请号 | CN202010786828.X | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN112029788A | 公开(公告)日 | 2020-12-04 |
申请公布号 | CN112029788A | 申请公布日 | 2020-12-04 |
分类号 | C12N15/70;C12P21/06;C07K7/06;C12R1/19 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 郭伟 | 申请(专利权)人 | 江苏亨瑞生物医药科技有限公司 |
代理机构 | 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人 | 黄美娟;李世玉 |
地址 | 225306 江苏省泰州市海陵区东方温莎小镇19栋301 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种利用原核表达系统表达纯化多肽的方法,所述方法为:将多肽单元的C端加上肠激酶酶切位点,N端加上组氨酸标签,获得重组多肽单元;然后从N端到C端依次将若干个重组多肽单元串联,获得重组蛋白的氨基酸序列;将重组蛋白的编码基因导入大肠杆菌,构建重组大肠杆菌;重组大肠杆菌诱导表达后,湿菌体用缓冲液重悬破碎后,提取重组蛋白;重组蛋白采用肠激酶处理后,获得多个多肽单元。本发明通过在要表达的短肽之间加上肠激酶的酶切位点,利用肠激酶处理最后可以保证得到大小和序列统一的目的短肽,有效的克服了无法利用原核系统表达多肽的难题。 |
