一种用于检测酶加dA尾效率的方法
基本信息
| 申请号 | CN201910041144.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN109680048A | 公开（公告）日 | 2019-04-26 |
| 申请公布号 | CN109680048A | 申请公布日 | 2019-04-26 |
| 分类号 | C12Q1/686（2018.01）I; C12Q1/6876（2018.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 郑贤杰; 秦雪梅; 朱乐敏; 曹振; 宋东亮 | 申请（专利权）人 | 上海翊圣生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 上海精晟知识产权代理有限公司 | 代理人 | 冯子玲 |
| 地址 | 200120 上海市浦东新区天雄路166弄1号楼3层301A | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供一种用于检测酶加dA尾效率的方法，包括：步骤一、合成5’末端分别为A、T、G、C的四组引物；步骤二、采用原核生物或者真核生物的全基因组作为模板，步骤三、对模板进行引物扩增，步骤四、制备相应的质粒，步骤五、得到模板质粒，步骤六、以模板质粒为模板，分别以四组引物作为引物，采用高保真酶进行扩增；步骤七、纯化回收步骤六的产物；步骤八、以步骤七中的产物作为模板，采用待检测的各个酶分别进行加dA尾或者PCR；步骤九、回收加dA尾的产物；步骤十、采用毛细管电泳检测各个待测酶的加dA尾的产物，对比评价各个待测酶的加dA尾效果。本发明能够直观分析待选酶和体系的性能，提高筛选的准确性和效率。 |
