高活性重组人糜蛋白酶制备方法和应用

基本信息

申请号 CN201310323446.3 申请日 -
公开(公告)号 CN104342423B 公开(公告)日 2019-11-22
申请公布号 CN104342423B 申请公布日 2019-11-22
分类号 C12N9/76(2006.01); A61K38/48(2006.01); A61P17/02(2006.01); C12R1/19(2006.01) 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 赵致; 安少朋 申请(专利权)人 上海雅心生物技术有限公司
代理机构 上海专利商标事务所有限公司 代理人 上海雅心生物技术有限公司
地址 201802 上海市嘉定区沪宜公路1188号20幢101室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及高活性重组人糜蛋白酶制备方法和应用。本发明的方法包括表达人糜蛋白酶包涵体,之后对其进行变性和复性处理、纯化,复性过程中调节特定的PH值、温度、稀释比例、添加剂成分,有效地提高了可溶性蛋白的得率,所获得的可溶性蛋白可良好地恢复天然态结构以及保持生物学活性,阳离子交换色谱相对于阴离子交换色谱更适合于重组人糜蛋白酶的纯化,获得高纯度、高活性的重组人糜蛋白酶。重组人糜蛋白酶与糜蛋白酶应用与大鼠烫伤模型具有同样的效果。