限制性凝血酶的制备方法
基本信息
| 申请号 | CN201610107662.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN105624134B | 公开（公告）日 | 2019-05-21 |
| 申请公布号 | CN105624134B | 申请公布日 | 2019-05-21 |
| 分类号 | C12N9/74（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 黄宏宝; 黄发灿; 郑登忠; 郭晓乾; 章丽丽 | 申请（专利权）人 | 福建华灿制药有限公司 |
| 代理机构 | 福州市博深专利事务所（普通合伙） | 代理人 | 福建华灿制药有限公司 |
| 地址 | 365000 福建省三明市三元区荆东工业园32号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供一种纯度高、比活高的限制性凝血酶的制备方法，利用阴离子交换层析介质从猪血浆中吸附凝血酶原，对阴离子层析柱进行洗脱，活化凝血酶原，得凝血酶粗溶液，经超滤浓缩，得凝血酶浓缩液，再用阳离子交换层析介质吸附凝血酶，对阳离子层析柱进行洗脱，得凝血酶溶液，经超滤脱盐浓缩，最后冻干得限制性凝血酶成品。本发明的有益效果在于：利用猪血制备限制性凝血酶，有利于充分利用猪血资源，减少环境污染；在常温常压下即可制备限制性凝血酶，减少设备投资；制备得到的限制性凝血酶纯度高，可达到电泳纯，可用于酶切GST融合蛋白；操作简单，仅需离心、上样层析、超滤和冻干等几个步骤，容易实现工业化生产。 |
