一种L-天冬氨酸β-脱羧酶产生菌的高通量筛选方法

基本信息

申请号 CN201410654586.3 申请日 -
公开(公告)号 CN105648036B 公开(公告)日 2020-05-19
申请公布号 CN105648036B 申请公布日 2020-05-19
分类号 C12Q1/527;C12Q1/04;C12R1/40 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 李东升;傅风华;张淑敏;杨小平 申请(专利权)人 山东国际生物科技园发展有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 264670 山东省烟台市高新区科技大道39号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种L‑天冬氨酸β‑脱羧酶产生菌的高通量筛选方法。该方法包括如下步骤:1)采用富集培养基对样品中的微生物进行富集培养与初步分离;2)然后将平板分离得到的单菌落接种96微孔板初筛半固体培养基,初筛得到L‑天冬氨酸β‑脱羧酶产生菌;3)对初筛得到的菌株接种24孔板液体培养,结合纸层析法复筛得到L‑天冬氨酸β‑脱羧酶高产菌株;4)对复筛得到的高产菌株进行摇瓶发酵,结合氧化显色法确认酶活性。本发明方法适用于L‑天冬氨酸β‑脱羧酶产生菌的高通量筛选,筛选的菌株具有耐碱性能,在细胞生产过程中避免了繁琐pH值控制步骤。同时也为同类生物酶产生菌的高通量筛选提供参考。