一种L-天冬氨酸β-脱羧酶产生菌的高通量筛选方法
基本信息
申请号 | CN201410654586.3 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN105648036B | 公开(公告)日 | 2020-05-19 |
申请公布号 | CN105648036B | 申请公布日 | 2020-05-19 |
分类号 | C12Q1/527;C12Q1/04;C12R1/40 | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 李东升;傅风华;张淑敏;杨小平 | 申请(专利权)人 | 山东国际生物科技园发展有限公司 |
代理机构 | - | 代理人 | - |
地址 | 264670 山东省烟台市高新区科技大道39号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种L‑天冬氨酸β‑脱羧酶产生菌的高通量筛选方法。该方法包括如下步骤:1)采用富集培养基对样品中的微生物进行富集培养与初步分离;2)然后将平板分离得到的单菌落接种96微孔板初筛半固体培养基,初筛得到L‑天冬氨酸β‑脱羧酶产生菌;3)对初筛得到的菌株接种24孔板液体培养,结合纸层析法复筛得到L‑天冬氨酸β‑脱羧酶高产菌株;4)对复筛得到的高产菌株进行摇瓶发酵,结合氧化显色法确认酶活性。本发明方法适用于L‑天冬氨酸β‑脱羧酶产生菌的高通量筛选,筛选的菌株具有耐碱性能,在细胞生产过程中避免了繁琐pH值控制步骤。同时也为同类生物酶产生菌的高通量筛选提供参考。 |
