一种基于解旋酶和切刻酶的等温扩增核酸检测方法及试剂盒

基本信息

申请号 CN201810922821.9 申请日 -
公开(公告)号 CN109097448A 公开(公告)日 2018-12-28
申请公布号 CN109097448A 申请公布日 2018-12-28
分类号 C12Q1/6844 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 陈瑞;陈杰 申请(专利权)人 深圳百纳心致生命科学有限公司
代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司 代理人 深圳市赛哲生物有限公司;广州赛哲生物科技股份有限公司;深圳百纳心致生命科学有限公司
地址 518067 广东省深圳市南山区招商街道南海大道以西美年国际广场1栋604-23
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基于解旋酶和切刻酶的等温扩增核酸检测方法,包括如下步骤:S1.根据目标核酸序列设计特异性扩增引物和带有切刻酶识别位点的Taqman探针;S2.将样本核酸经酶处理得到单链目标核酸模板;S3.将S1所得Taqman探针与S2所得单链目标核酸模板特异性结合,得到特异性结合产物,使用切刻酶酶切特异性结合产物,并实时检测荧光信号。本发明将解旋酶与切刻酶联合使用,设计带有切刻酶切割位点的Taqman探针,无需扩增出大量核酸产物,只需要产生适量单链模板,然后用切刻酶不断切割与靶位点结合的探针即可进行检测,可以避免等温扩增容易造成实验室污染的缺点,操作简便、快速,适用于现场快速检测。