人重组组织因子的构建表达、纯化方法及其应用专利查询专利号|摘要-满商公司网

人重组组织因子的构建表达、纯化方法及其应用

基本信息

申请号	CN200510012414.7	申请日	-
公开（公告）号	CN1284797C	公开（公告）日	2006-11-15
申请公布号	CN1284797C	申请公布日	2006-11-15
分类号	C07K14/435(2006.01);C07K14/475(2006.01);C12N15/70(2006.01);C12N15/10(2006.01);C12N15/12(2006.01);C12P21/02(2006.01);G01N33/68(2006.01);G01N33/53(2006.01);C12Q1/56(2006.01)	分类	有机化学〔2〕;
发明人	焦进安;赵邑;郝建平;李晋川;谢红;赵峰梅	申请（专利权）人	太原博奥特生物技术有限公司
代理机构	山西五维专利事务所	代理人	太原博奥特生物技术有限公司
地址	030006山西省太原市师范街110号
法律状态	-

摘要

本发明涉及人重组组织因子的构建、表达和纯化方法及应用。从人胎盘中获取得到的TF基因片段与phoA质粒重组，构建质粒载体pTF₂₄₃，转化到大肠杆菌MM294中，筛选得到工程菌株，接入培养基直接发酵表达，得到的菌液先使用Q-Sepharose Fast Flow基质离子交换层析，再通过TF单抗免疫亲和层析柱吸附洗脱，得到rhTF₂₄₃蛋白。本发明中TF随培养基中磷的消耗而直接表达，不需增加诱导物和对蛋白质进行变性与复性，简化了发酵工艺，提高了表达率，采用TF单抗纯化rhTF₂₄₃蛋白，不会受到不可逆损伤，获得rhTF₂₄₃纯度95％以上，收率大于60％，制备的PT试剂稳定性和敏感性均得到了提高。