基于高通量测序的PCR产物大样本量混合建库的文库构建方法和试剂
基本信息
| 申请号 | CN201710107944.2 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN108504651A | 公开（公告）日 | 2018-09-07 |
| 申请公布号 | CN108504651A | 申请公布日 | 2018-09-07 |
| 分类号 | C12N15/10;C40B50/06 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 陈建国;陈川;张静;王瑢;杨传春;张文勇 | 申请（专利权）人 | 深圳市乐土精准医疗科技有限公司 |
| 代理机构 | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 | 代理人 | 孙银行;彭家恩 |
| 地址 | 518000 广东省深圳市南山区沙河西路深圳湾科技生态园一区2栋C座9层 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种基于高通量测序的PCR产物大样本量混合建库的文库构建方法和试剂。方法包括：将来源于不同样本DNA的多个PCR产物中的每一个，分别与带有标签序列的随机引物进行退火，并在恒温扩增酶的作用下进行恒温扩增反应；将不同样本来源的恒温扩增产物混合，并对混合产物进行片段选择；对片段选择的产物进行5’磷酸化平末端修复和3’末端加A反应；与接头序列连接，以得到能够区分文库信息的连接产物；对连接产物进行PCR扩增，以得到适用于高通量测序的上机文库。本发明不依赖于超声打断仪器；实现混合建库，降低建库成本及复杂度；减少数据浪费，提高测序数据的碱基随机性、覆盖深度均一性，从而降低单个样本的测序成本。 |
