适应羊口疮病毒增殖的永生化羊睾丸细胞系的构建方法
基本信息
| 申请号 | CN201811179275.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111019904A | 公开（公告）日 | 2020-04-17 |
| 申请公布号 | CN111019904A | 申请公布日 | 2020-04-17 |
| 分类号 | C12N5/10;C12N15/867 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 丁国杰;杨朋欣;冯育宁;周建华;薛晓娟;郑玉芳;李媛妹;池贤凤;侯丹丹 | 申请（专利权）人 | 安徽东方帝维生物制品股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京思元知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 余光军;杨惠 |
| 地址 | 236800 安徽省亳州市经济开发区亳菊路889号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种适应羊口疮病毒(ORFV)增殖的永生化羊睾丸细胞系的构建方法，包括将SV40大T抗原通过慢病毒载体导入原代羊睾丸细胞，通过细胞克隆技术，筛选和纯化可持续传代的细胞，最终筛选出一株传代和生长性能良好的永生化细胞株。病毒感染和复制动力学试验表明，本发明所构建的永生化细胞系为ORFV适应细胞系，命名为羊睾丸细胞DST‑3，F10代细胞DST‑3接种ORFV AH‑GY13株，毒价达10‑6.4TCID50/ml，与在原代细胞中的复制水平相似。本发明为ORFV弱毒疫苗和灭活疫苗的研制与生产提供了稳定的细胞环境和标准化的培养方法。 |
