一种高效构建sgRNAs质粒文库的方法
基本信息
申请号 | CN202111338971.3 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN113981547A | 公开(公告)日 | 2022-01-28 |
申请公布号 | CN113981547A | 申请公布日 | 2022-01-28 |
分类号 | C40B50/06(2006.01)I;C40B40/06(2006.01)I;C12N15/113(2010.01)I | 分类 | 组合技术〔8〕; |
发明人 | 金鸣;袁鹏飞 | 申请(专利权)人 | 博雅缉因(北京)生物科技有限公司 |
代理机构 | 北京彩和律师事务所 | 代理人 | 张红春 |
地址 | 102206北京市昌平区科学园路22号2栋2层 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种高效构建sgRNAs质粒文库的方法和用该方法制备的sgRNAs质粒文库。所述方法包括:1)合成和扩增sgRNA序列;2)将sgRNA序列通过酶切连接,插入质粒载体;3)将步骤2)获得的包含sgRNA序列的质粒载体通过电击转化感受态细胞;和4)扩增培养。本发明对电击转化建库过程中涉及的关键参数进行交叉组合,通过评估电击转化效率以及文库质量等,显著降低文库构建时的工作量,为sgRNA质粒文库构建提供了稳定高效的方法。 |
