双sgRNA文库的构建及其应用于高通量功能性筛选研究的方法
基本信息
| 申请号 | CN201610969127.3 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN106637421B | 公开（公告）日 | 2019-12-27 |
| 申请公布号 | CN106637421B | 申请公布日 | 2019-12-27 |
| 分类号 | C40B50/06;C12N15/867;C12Q1/6869 | 分类 | 组合技术〔8〕; |
| 发明人 | 魏文胜;朱诗优 | 申请（专利权）人 | 博雅缉因（北京）生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 刘元霞;牛艳玲 |
| 地址 | 102206 北京市昌平区中关村生命科学园科学园路22号2幢2层201-203室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供构建pgRNA表达质粒文库的方法，所述pgRNA表达质粒文库当与Cas蛋白一同被引入细胞中时，可以使得基因组上两个sgRNA靶位点被切割，引起靶核酸序列的敲除，通过靶核酸序列的敲除筛选功能性的核酸序列。本发明还提供构建核酸序列敲除文库的方法，所述核酸序列敲除文库通过将本发明的pgRNA文库转入细胞获得，所述基因敲除文库可用于筛选功能性核酸序列。本发明还提供高通量筛选功能性核酸序列的方法。本发明是一种高通量CRISPR/Cas策略，可以使用多对gRNA(pgRNA)产生大量核酸序列的删除，使得能够快速鉴别功能性核酸序列。 |
