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一种基于固相法分离N-糖肽和O-糖肽的方法

基本信息

申请号	CN202011481041.9	申请日	-
公开（公告）号	CN112578061A	公开（公告）日	2021-03-30
申请公布号	CN112578061A	申请公布日	2021-03-30
分类号	G01N30/08(2006.01)I;G01N30/88(2006.01)I	分类	测量；测试;
发明人	杨霜;李舒伟	申请（专利权）人	南京谱利健生物技术有限公司
代理机构	上海浙晟知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	杨小双
地址	211500江苏省南京市栖霞区仙林街道仙林大学城纬地路9号D6栋1002室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种基于固相法分离N‑糖肽和O‑糖肽的方法，首先通过还原胺化反应将糖蛋白偶联到固相树脂上，然后对糖蛋白唾液酸进行衍生化并清洗，再加入蛋白消化酶对固定在树脂上的糖蛋白进行降解处理。产生的糖肽用亲水色谱柱富集。然后通过表面修饰凝集素的固相柱，将O‑糖肽保留在凝集素固相柱上，而N‑糖肽包含在过滤液中。采用O‑糖肽切割酶(OpeRATOR)，将结合在凝集素上的O‑糖肽切割洗脱；或采用多肽变性方法将O‑糖肽洗脱。这样就将N‑糖肽和O‑糖肽分别进行了富集分离，本方法对研究各种病毒的致病机制，包括新型冠状病毒COVID‑19，禽流感、寨卡病毒(Zika virus)和登革病毒(Denge virus)，开发疫苗等方面有着重要意义。