一种检测蛋白磷酸化和乙酰氨基葡萄糖化关联作用的方法
基本信息
申请号 | CN201910893435.6 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN110609078A | 公开(公告)日 | 2019-12-24 |
申请公布号 | CN110609078A | 申请公布日 | 2019-12-24 |
分类号 | G01N27/62;G01N1/28;G01N1/34;G01N1/40;C07D495/04 | 分类 | 测量;测试; |
发明人 | 李舒伟;丁慧娜 | 申请(专利权)人 | 南京谱利健生物技术有限公司 |
代理机构 | 南京众联专利代理有限公司 | 代理人 | 南京谱利健生物技术有限公司 |
地址 | 210033 江苏省南京市栖霞区仙林大学城纬地路9号F7栋305室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种检测蛋白磷酸化和乙酰氨基葡萄糖化关联作用的方法,所述方法包括以下步骤:将胰蛋白酶处理得到的多肽样品平均分配成三等分,第一个等分用磷酸酶处理,用IBT‑10Plex116C标记;第二个等分用O‑乙酰葡萄糖胺水解酶处理,用IBT‑10Plex117N标记;第三等分无特殊处理,用IBT‑10Plex118N标记;样品混合,与氢氧化钡、一个含有生物素和巯基的双官能团化合物反应,通过链霉亲和素蛋白‑磁珠从混合物中被亲和富集;用紫外光光照除去含巯基化合物的其他结构,得到多肽衍生物用于质谱分析。本发明可以找出整个蛋白质组中同时具有磷酸化和O‑GlcNAcylation的Ser/Thr位点,为有氧糖酵解和信号转导通道之间的关系提供了具体数据,促进癌细胞特定生物标志物的发现,用于肿瘤的早期诊断以及治疗药物新靶点。 |
