一种基于高通量测序技术检测目的微生物基因组RNA的方法

基本信息

申请号 CN202010809329.8 申请日 -
公开(公告)号 CN114075596A 公开(公告)日 2022-02-22
申请公布号 CN114075596A 申请公布日 2022-02-22
分类号 C12Q1/6869(2018.01)I;C12Q1/6806(2018.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 马珍子;林永权;吴红龙 申请(专利权)人 深圳华大基因股份有限公司
代理机构 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 代理人 张海平;彭家恩
地址 518057广东省深圳市南山区粤海街道高新区社区高新南四道025号高新工业村W2A栋、B栋A栋201203A5
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于高通量测序和微生物检测技术领域,具体涉及一种基于高通量测序技术检测目的微生物基因组RNA的方法。本发明方法包括对包含目的微生物的待测样本进行核酸提取、DNA消化、RNA纯化、RNA片段化、反转录合成cDNA分子、cDNA文库构建、高通量测序和测序数据分析,检测出样本中目的微生物基因组RNA的状况。在DNA消化步骤中,采用DNA酶在37℃至42℃下孵育10至30分钟的温和条件下进行消化,并且进一步地,在RNA片段化步骤中采用热打断手段。本发明方法由于采用了温和的消化手段和热打断手段,可以高效、快速、低成本地富集微生物基因组RNA,提高微生物基因组RNA的含量,提高RNA高通量测序文库构建的成功率,从而提高微生物基因组RNA的检测灵敏度。