一种构建DNA片段敲除文库的方法

基本信息

申请号 CN202011219314.2 申请日 -
公开(公告)号 CN113462681A 公开(公告)日 2021-10-01
申请公布号 CN113462681A 申请公布日 2021-10-01
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C40B40/02(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 蒋栋;王江华;谢兴旺;王雪艳;毕晶磊;史云强 申请(专利权)人 北京可瑞生物科技有限公司
代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 代理人 商秀玲
地址 102200北京市昌平区沙河镇能源东路1号院1号楼3层317-2
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种构建DNA片段敲除文库的方法,具体涉及基于Cpf1系统构建拟敲除片段上下游sgRNA序列的阵列,形成sgRNA敲除文库。在本发明所述方法中,拟敲除片段上下游的同侧sgRNA间隔在30‑100bp;拟敲除片段上下游的两侧sgRNA间隔小于10kb,以此sgRNA设置标准设计得到的sgRNA阵列,对DNA片段删除效率更高更准确。本发明所述的拟敲除片段可以是编码基因、非编码RNA、miRNA、甲基化岛、启动子或增强子中的一种或多种。