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一种乳液中进行环介导等温扩增的突变核酸数字分析方法

基本信息

申请号 CN201710838661.5 申请日 -
公开（公告）号 CN107447031B 公开（公告）日 2020-07-03
申请公布号 CN107447031B 申请公布日 2020-07-03
分类号 C12Q1/6844 分类 -
发明人 蒋健晖;唐丽娟;陈基耘;钟志坚 申请（专利权）人 湖南融健生物科技有限公司
代理机构 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 代理人 湖南融健基因生物科技有限公司
地址 410021 湖南省长沙市雨花区雨花路88号裕华名苑4栋2219、2220室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种乳液中进行环介导等温扩增的突变核酸数字分析方法，将生物素标记的环引物与亲和素标记的磁珠结合后，与环介导等温扩增的内引物、另一荧光标记的内引物、环引物及缓冲溶液、目标核酸、酶等反应试剂混合均匀，与油相在机械作用力下混合均匀，形成稳定的乳液，在适宜的反应温度下，乳液中存在目标突变核酸的液滴发生环介导等温扩增反应，得到磁性颗粒‑LAMP产物‑荧光标记内引物的复合物，破乳后收集反应得到的磁珠，通过显微镜和流式细胞仪实现突变核酸的数字分析。本发明所述的突变核酸数字分析方法利用环介导等温扩增的优势缩短了时间、提高了效率，实现了突变核酸的定量分析。