一种体外培养脐带血CIK细胞的方法
基本信息
申请号 | CN202010984155.9 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN112029723B | 公开(公告)日 | 2021-08-06 |
申请公布号 | CN112029723B | 申请公布日 | 2021-08-06 |
分类号 | C12N5/0783(2010.01)I;C12N5/078(2010.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 杜炜明;张陇娟;梁杰;马超群 | 申请(专利权)人 | 陕西中港万海生命科学研究院有限公司 |
代理机构 | 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 饶富春 |
地址 | 712000陕西省咸阳市秦都区高新区高科三路中韩产业园A区205厂房 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种体外培养脐带血CIK细胞的方法,包括以下步骤:(1)从脐带血中分离得到脐带血单个核细胞,用无血清培养基制备为单核细胞悬液;(2)向上述步骤(1)的细胞悬液中添加IFN‑γ850‑950U/mL,培养1天后添加IL‑2 600‑700U/mL、单抗CD3 20‑30ng/mL、三肽‑1铜20‑50ng/mL,继续培养;(3)培养至第3‑4天添加甜叶菊苷110‑120ng/mL,积雪草苷80‑100ng/mL,诱导培养至第12天收集细胞,在诱导培养过程中每隔1‑2天添加无血清培养基使细胞浓度保持在1‑2×10个/mL,无血清培养基中含有甜叶菊苷35‑40ng/mL,积雪草苷20‑30ng/mL。本发明采用无血清培养基,在培养过程中添加三肽‑1铜,甜叶菊苷和积雪草苷,诱使扩增得到的CIK细胞数量多,并且保持较好的细胞活性,提高其在临床应用中的价值。 |
