一种体外培养脐带血CIK细胞的方法

基本信息

申请号 CN202010984155.9 申请日 -
公开(公告)号 CN112029723B 公开(公告)日 2021-08-06
申请公布号 CN112029723B 申请公布日 2021-08-06
分类号 C12N5/0783(2010.01)I;C12N5/078(2010.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 杜炜明;张陇娟;梁杰;马超群 申请(专利权)人 陕西中港万海生命科学研究院有限公司
代理机构 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 饶富春
地址 712000陕西省咸阳市秦都区高新区高科三路中韩产业园A区205厂房
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种体外培养脐带血CIK细胞的方法,包括以下步骤:(1)从脐带血中分离得到脐带血单个核细胞,用无血清培养基制备为单核细胞悬液;(2)向上述步骤(1)的细胞悬液中添加IFN‑γ850‑950U/mL,培养1天后添加IL‑2 600‑700U/mL、单抗CD3 20‑30ng/mL、三肽‑1铜20‑50ng/mL,继续培养;(3)培养至第3‑4天添加甜叶菊苷110‑120ng/mL,积雪草苷80‑100ng/mL,诱导培养至第12天收集细胞,在诱导培养过程中每隔1‑2天添加无血清培养基使细胞浓度保持在1‑2×10个/mL,无血清培养基中含有甜叶菊苷35‑40ng/mL,积雪草苷20‑30ng/mL。本发明采用无血清培养基,在培养过程中添加三肽‑1铜,甜叶菊苷和积雪草苷,诱使扩增得到的CIK细胞数量多,并且保持较好的细胞活性,提高其在临床应用中的价值。