高效制备口蹄疫病毒样颗粒的重组DNA载体、应用和疫苗

基本信息

申请号 CN201910476738.8 申请日 -
公开(公告)号 CN110129348A 公开(公告)日 2019-08-16
申请公布号 CN110129348A 申请公布日 2019-08-16
分类号 C12N15/63;C12N15/42;C07K14/09;A61K39/135;A61P31/14;G01N33/569 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 许雁;诺曼.吉利卡;李改;夏燕 申请(专利权)人 诺华生物科技(武汉)有限责任公司
代理机构 上海精晟知识产权代理有限公司 代理人 诺华生物科技(武汉)有限责任公司;许雁
地址 430073 湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号B1栋203室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种用于高效制备口蹄疫病毒样颗粒的重组DNA载体,以及利用包含该重组DNA载体的重组表达质粒载体转染宿主细胞制备的口蹄疫病毒样颗粒、其应用及疫苗。针对3C蛋白酶对宿主细胞的毒性及影响口蹄疫VLP的产量问题,本发明设计了针对3C蛋白酶基因表达起干扰作用的3CshRNA片段,明显减少了口蹄疫VLP制备过程中3C蛋白酶的表达量,同时在原始口蹄疫病毒3C蛋白酶基因的基础上进行三个位点的突变,特异性调节了3C蛋白酶的作用效果。通过对3C蛋白酶基因的改造,降低了3C蛋白酶对宿主细胞的毒性并提高了3C蛋白酶对口蹄疫病毒P1前体蛋白的有效切割性能,从而显著提高了口蹄疫病毒样颗粒的合成产量,为大规模生产和使用口蹄疫病毒样颗粒疫苗奠定了基础。