一种改造后的荧光素酶基因、含该基因的重组载体、工程菌及其构建方法和发酵方法

基本信息

申请号 CN201510346941.5 申请日 -
公开(公告)号 CN105018504A 公开(公告)日 2015-11-04
申请公布号 CN105018504A 申请公布日 2015-11-04
分类号 C12N15/53(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 黄和;徐晴;王磊;毕建成;贺沧 申请(专利权)人 镇江泰和益元生物科技有限公司
代理机构 南京天华专利代理有限责任公司 代理人 徐冬涛;杨秀丽
地址 212400 江苏省镇江市句容市经济开发区科技新城科技大道1号3幢403室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明属于微生物发酵技术领域,提供一种改造后的荧光素酶基因,具体涉及含该基因的重组载体、该载体的构建方法、含有该载体的工程菌以及该工程菌生产荧光素酶的方法。该荧光素酶基因fl核苷酸序列由萤火虫荧光素酶核苷酸序列改造而成,其序列如SEQ?ID?NO.1所示。所述重组载体是pET22b-fl-linker-aox,通过linker连接米根霉aox基因片段导入原始载体pET22b中获得重组载体;该载体包括fl-linker-aox,序列如SEQ?ID?NO.2所示。本发明利用大肠杆菌的偏爱密码子,对萤火虫荧光素酶进行了密码子优化,利于该荧光素酶基因能在后期大肠杆菌工程菌中顺利高效表达。