一种基于家蚕-杆状病毒系统制备人髓过氧化物酶的方法

基本信息

申请号 CN201510553322.3 申请日 -
公开(公告)号 CN105112382A 公开(公告)日 2015-12-02
申请公布号 CN105112382A 申请公布日 2015-12-02
分类号 C12N9/08(2006.01)I;C12N15/866(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 陈俏梅;周亚竟;孙祥明;张茜;张倩;陈焰;陈慧卿;陈克平;傅海龙;王红勋 申请(专利权)人 中山瑞福医疗器械科技有限公司
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地址 212013 江苏省镇江市京口区学府路301号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基于家蚕-杆状病毒系统制备人髓过氧化物酶的方法,涉及基因工程和生物技术领域。将完整的人髓过氧化物酶MPO的cDNA克隆到自身含6个组氨酸的供体质粒上,获得含人MPO基因的重组供体质粒;在大肠杆菌BmDH10Bac中和家蚕杆状病毒基因组杆粒于转座子上发生转座,通过蓝、白斑筛选出带有目的基因的克隆,随后在家蚕细胞中制备含人MPO基因的重组病毒;用获得的含目的基因的重组病毒感染宿主昆虫家蚕,同时给家蚕添加一定量的血红素前体;收集家蚕幼虫的体液,经超声波裂解,下进行高速离心,收集的上清进行分离纯化,最终获得目的产物。本发明利用家蚕作为生物反应器,大规模、低成本、高效率地制备重组人MPO的方法。