通用型CAR-T细胞、其制备方法及其应用
基本信息
申请号 | CN201911407988.2 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN110951695A | 公开(公告)日 | 2020-04-03 |
申请公布号 | CN110951695A | 申请公布日 | 2020-04-03 |
分类号 | C12N5/10(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 姜舒;张芸;熊斌;王冰;纪惜銮 | 申请(专利权)人 | 深圳市茵冠生物科技有限公司 |
代理机构 | 深圳市博锐专利事务所 | 代理人 | 深圳市茵冠生物科技有限公司 |
地址 | 518000广东省深圳市南山区西丽镇茶光路1089号深圳集成电路设计应用产业园304 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及一种通用型CAR‑T细胞、其制备方法及其应用,该通用型CAR‑T细胞的制备方法,包括以下步骤:(1)利用扩增引物P1‑P5分别对pCDH、3gRNA、EF1α、GPC3 CAR‑1和GPC3 CAR‑2片段进行PCR扩增,然后将获得的扩增片段依次进行连接;采用引物P6对连接产物进行PCR扩增,将扩增产物进行电泳鉴定,鉴定正确后转化至感受态细胞;构建获得pLenti‑3gRNA‑EF1α‑GPC3 CAR重组慢病毒质粒,包装病毒颗粒;(2)感染扩增后的T淋巴细胞,通过电转化导入Cas9 mRNA,获得所述通用型CAR‑T细胞。本发明具有免疫排斥反应低、肿瘤细胞杀伤效率高的优点。 |
