通用型CAR-T细胞、其制备方法及其应用

基本信息

申请号 CN201911407988.2 申请日 -
公开(公告)号 CN110951695A 公开(公告)日 2020-04-03
申请公布号 CN110951695A 申请公布日 2020-04-03
分类号 C12N5/10(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 姜舒;张芸;熊斌;王冰;纪惜銮 申请(专利权)人 深圳市茵冠生物科技有限公司
代理机构 深圳市博锐专利事务所 代理人 深圳市茵冠生物科技有限公司
地址 518000广东省深圳市南山区西丽镇茶光路1089号深圳集成电路设计应用产业园304
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种通用型CAR‑T细胞、其制备方法及其应用,该通用型CAR‑T细胞的制备方法,包括以下步骤:(1)利用扩增引物P1‑P5分别对pCDH、3gRNA、EF1α、GPC3 CAR‑1和GPC3 CAR‑2片段进行PCR扩增,然后将获得的扩增片段依次进行连接;采用引物P6对连接产物进行PCR扩增,将扩增产物进行电泳鉴定,鉴定正确后转化至感受态细胞;构建获得pLenti‑3gRNA‑EF1α‑GPC3 CAR重组慢病毒质粒,包装病毒颗粒;(2)感染扩增后的T淋巴细胞,通过电转化导入Cas9 mRNA,获得所述通用型CAR‑T细胞。本发明具有免疫排斥反应低、肿瘤细胞杀伤效率高的优点。