一种人母乳干细胞的制备方法及其应用

基本信息

申请号 CN201710092955.8 申请日 -
公开(公告)号 CN106701663B 公开(公告)日 2019-12-27
申请公布号 CN106701663B 申请公布日 2019-12-27
分类号 C12N5/074;A61L27/38 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 姜舒;张芸;纪惜銮;杨顺;罗朝霞 申请(专利权)人 深圳市茵冠生物科技有限公司
代理机构 广州瑞之凡知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 深圳市茵冠生物科技有限公司
地址 518055 广东省深圳市南山区茶光路1089号深圳集成电路设计应用产业园304
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种人母乳干细胞的制备方法及其应用,其中的制备方法包括以下步骤:采集母乳;分离人母乳细胞,得到纯化后的母乳细胞悬液;将纯化后的母乳细胞悬液转移到包被体积百分比为0.01‑0.05%的明胶的培养板中,置于CO2培养箱中培养,每天换液1次,第6天分离单个细胞克隆并接种到新的超低粘附培养板中,促进克隆形成;当细胞融合至80%以上时,添加胰蛋白酶,37℃消化5min,终止消化,收集细胞沉淀,洗涤离心后,用新鲜的细胞培养液重悬细胞,按1:3传代。采用本发明的技术方案,操作简便,无需采用饲养层细胞共培养,而且可以更好的维持人母乳干细胞未分化状态,且获得的人母乳干细胞数量更多。