长效重组人促红素的生产方法

基本信息

申请号 CN201711452469.9 申请日 -
公开(公告)号 CN107937425A 公开(公告)日 2018-04-20
申请公布号 CN107937425A 申请公布日 2018-04-20
分类号 C12N15/62;C07K19/00;C07K1/22;C07K1/16 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 程度胜;桑建彬;薛霞;韩明娣;龙应国 申请(专利权)人 北京四环生物制药有限公司
代理机构 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 北京四环生物制药有限公司
地址 100176 北京市大兴区建安街5号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种长效重组人促红素的生产方法,包括如下步骤;将人IgG2的Fc片段基因连接到人促红素基因的3′端,利用脂质体将含有hEPO‑Fc重组基因的质粒转染CHO细胞;CHO细胞用无血清基质经扩增培养,在培养液中分泌表达rhEPO‑Fc融合蛋白;培养液经过离心,取上清液,调pH值至3.5‑4.0,滤膜过滤除去沉淀物;过滤后含目的蛋白的溶液上rProtein A Beads层析柱进行层析分离,得粗rhEPO‑Fc融合蛋白;粗rhEPO‑Fc融合蛋白洗脱液用分子筛Superdex 200prep grade进行纯化,得精rhEPO‑Fc融合蛋白。这种方法成本低,适合工业化生产。