一种昆虫细胞表达系统载体重组质粒及其制备方法与应用

基本信息

申请号 CN202210081904.6 申请日 -
公开(公告)号 CN114540388A 公开(公告)日 2022-05-27
申请公布号 CN114540388A 申请公布日 2022-05-27
分类号 C12N15/64(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/90(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;A61K39/00(2006.01)I;A61P31/12(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 刘磊磊;刘凯于;魏巍;徐培文 申请(专利权)人 武汉生物工程学院
代理机构 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 代理人 -
地址 430415湖北省武汉市阳逻经济开发区汉施路1号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种昆虫细胞表达系统载体重组质粒及其制备方法与应用,所述方法包括:获得pIE2‑GFP‑N1载体并线性化,获得两端分别为EcoR I和BamH I粘性末端的线性化载体;将上游引物Insert‑FP和下游引物Insert‑RP扩增目的基因,获得带有与线性化载体重复序列的目的基因片段;所述上游引物Insert‑FP的序列为:5’‑AGATCTCGAGCTCAAGCTTCGGCCACC+目的基因上游特异性引物‑3’;所述下游引物Insert‑RP的序列为5’‑GGTGGCGACCGGTGGATCACCTCCGCCACCGCCTCC+目的基因上游特异性引物‑3’;将所述线性化载体和所述目的基因片段连接,获得昆虫细胞表达系统载体重组质粒。省时省力且阳性率高。