利用RNAi技术和RNAi rescue原理制备突变型克隆载体的方法及应用专利查询专利号|摘要-满商公司网

利用RNAi技术和RNAi rescue原理制备突变型克隆载体的方法及应用

基本信息

申请号	CN200910146262.8	申请日	-
公开（公告）号	CN101880684A	公开（公告）日	2010-11-10
申请公布号	CN101880684A	申请公布日	2010-11-10
分类号	C12N15/66(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	曹跃琼	申请（专利权）人	苏州吉凯基因科技有限公司
代理机构	上海光华专利事务所	代理人	许亦琳;余明伟
地址	215316 江苏省昆山市玉山镇北门路757号
法律状态	-

摘要

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种利用RNAi技术和RNAi?rescue原理制备突变型克隆载体的方法及应用，包括如下步骤：目的基因RNAi有效靶点设计和载体构建；RNAitarget?mRNA区第三个碱基同义突变；多重PCR获得含同义突变的目的基因全长mRNA；突变型克隆载体构建；突变型克隆载体构建成功证明；回复功能实验。本发明的方法通过RNAi沉默基因观察功能变化情况，回复突变的载体与RNAi同时感染或转染目的细胞，一方面沉默内源目的基因，但不沉默外源目的基因，通过外源突变型载体表达与内源相同功能的蛋白，经过这样组合处理细胞功能不发生改变；或者将突变型载体导入RNAi沉默后，功能得到回复，证明功能表型是由此基因引起的。本发明为基因功能研究提供了一种新的模型和方法。