一种高专一性的测定小RNA的方法
基本信息
申请号 | CN201110054104.7 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN102676637A | 公开(公告)日 | 2012-09-19 |
申请公布号 | CN102676637A | 申请公布日 | 2012-09-19 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 谭若颖;吴鸿菲;龚祖埙;丁航海 | 申请(专利权)人 | 上海盛元生物技术有限公司 |
代理机构 | 上海天翔知识产权代理有限公司 | 代理人 | 生元科技有限公司;上海翔琼生物技术有限公司 |
地址 | 中国香港德辅道中249~253号东宁大厦9楼 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明提供了一种高专一性测定小RNA的方法。具体地,本发明方法包括步骤:(a)在小RNA的3’端添加polyA尾;(b)加入与所述的小RNA的polyA尾部互补或基本互补的引物,进行退火;(c)对小RNA进行反转录,形成cDNA;(d)在含有EvaGreen荧光染料的PCR反应体系中,对所述cDNA进行PCR扩增,从而形成双链DNA-EvaGreen荧光染料复合物,以及通过检测扩增产物来确定待检测的小RNA的存在与否和/或数量。和现有的定量检测小RNA的方法相比,本发明方法可显著提高检测小RNA(包括非编码RNA)的专一性。 |
