一种高专一性的测定小RNA的方法

基本信息

申请号 CN201110054104.7 申请日 -
公开(公告)号 CN102676637A 公开(公告)日 2012-09-19
申请公布号 CN102676637A 申请公布日 2012-09-19
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 谭若颖;吴鸿菲;龚祖埙;丁航海 申请(专利权)人 上海盛元生物技术有限公司
代理机构 上海天翔知识产权代理有限公司 代理人 生元科技有限公司;上海翔琼生物技术有限公司
地址 中国香港德辅道中249~253号东宁大厦9楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种高专一性测定小RNA的方法。具体地,本发明方法包括步骤:(a)在小RNA的3’端添加polyA尾;(b)加入与所述的小RNA的polyA尾部互补或基本互补的引物,进行退火;(c)对小RNA进行反转录,形成cDNA;(d)在含有EvaGreen荧光染料的PCR反应体系中,对所述cDNA进行PCR扩增,从而形成双链DNA-EvaGreen荧光染料复合物,以及通过检测扩增产物来确定待检测的小RNA的存在与否和/或数量。和现有的定量检测小RNA的方法相比,本发明方法可显著提高检测小RNA(包括非编码RNA)的专一性。