一种莽草酸生产用基因工程菌株的构建方法
基本信息
| 申请号 | CN201110248675.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN102304539B | 公开（公告）日 | 2013-05-01 |
| 申请公布号 | CN102304539B | 申请公布日 | 2013-05-01 |
| 分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 王春阳;张蕴才;武广君;孟军虎;任存邦;董建辉;石玲珑;李晓霞;乔娟平;叶晓冲;王娜 | 申请（专利权）人 | 河南孟成生物药业股份有限公司 |
| 代理机构 | 郑州联科专利事务所（普通合伙） | 代理人 | 时立新 |
| 地址 | 472500 河南省三门峡市灵宝市弘农路中段许家场1号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种莽草酸生产用基因工程菌株的构建方法，其包括以下步骤：①构建aroA基因敲除的大肠杆菌菌株；②构建含有莽草酸代谢途径中的关键酶基因aroGFBR、aroE、aroB、aroD、tktA和ppsA的重组表达质粒pAR63，且这些基因均处于色氨酸启动子Ptrp的转录控制下；③将重组表达质粒pAR63转入已敲除aroA基因的大肠杆菌菌株，获得表达莽草酸的生产菌株。本发明方法通过敲除aroA单基因实现中断莽草酸代谢的目的，敲除基因少，操作难度小，基因的表达处于自动开关状态，在中后期自动启动，无需诱导物的诱导，减少了向培养基中添加有毒物质的可能性，莽草酸产量高。 |
