基于CRISPR/Cas9系统对博落回PDS基因编辑体系的构建方法及应用

基本信息

申请号 CN202010876340.6 申请日 -
公开(公告)号 CN111979264A 公开(公告)日 2020-11-24
申请公布号 CN111979264A 申请公布日 2020-11-24
分类号 C12N15/84(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 曾建国;黄鹏;孙梦姗 申请(专利权)人 湖南美可达生物资源股份有限公司
代理机构 长沙楚为知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 湖南美可达生物资源股份有限公司
地址 410300湖南省长沙市浏阳经济技术开发区康万路190号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9系统对博落回PDS基因编辑体系的构建方法,包括以下步骤:S1、根据SEQ ID NO.1所示的博落回PDS基因的编码区避开内含子区域设计一条如SEQ ID NO.3所示的靶序列;S2、利用步骤S1所述的靶序列,合成一对互补的靶序列,然后构建真核表达载体,筛选出连接正确的重组载体;S3、将步骤S2中连接正确的表达载体转化农杆菌,并进行博落回外植体的侵染,将外植体进行组织培养后,获得突变植株,构建了基于CRISPR/Cas9的博落回基因的构建体系,为首次在博落回植物中实现基因编辑,为博落回中功能基因挖掘、种质创新等提供有力途径。