一种细胞水平筛选金属基质蛋白酶抑制剂的方法
基本信息
| 申请号 | CN201210103880.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN102618620B | 公开（公告）日 | 2016-08-24 |
| 申请公布号 | CN102618620B | 申请公布日 | 2016-08-24 |
| 分类号 | C12Q1/02(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 鲁晓锋;史小娟 | 申请（专利权）人 | 上海健耕医药科技股份有限公司 |
| 代理机构 | 上海泰能知识产权代理事务所 | 代理人 | 上海健耕医药科技有限公司;上海云泽生物科技有限公司;上海健耕医药科技股份有限公司 |
| 地址 | 201112 上海市闵行区联航路1188号浦江智谷10号楼3楼C座 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种细胞水平筛选金属基质蛋白酶抑制剂的方法，包括：(1)设计引物，PCR扩增金属基质蛋白酶的全长cDNA；(2)构建以Retro?X?Tet?Off为载体的表达体系；(3)将上述构建完成的载体对细胞系进行转染，并筛选阳性克隆，当细胞铺满皿底后，将培养基换为不含DOX的培养基，诱导MMPs的表达；(4)筛选出金属基质蛋白酶抑制剂。本发明建立了一个基于Tet?off表达系统的，能最大程度模拟MMP的作用环境的方法，用于MMP抑制剂的筛选，相对一般金属基质蛋白酶抑制剂体外筛选更准确。 |
