一种利用高通量测序技术快速获得纳米抗体的方法
基本信息
| 申请号 | CN201710124496.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN106866821A | 公开（公告）日 | 2017-06-20 |
| 申请公布号 | CN106866821A | 申请公布日 | 2017-06-20 |
| 分类号 | C07K16/18(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
| 发明人 | 李福胜;庄文超;李洪利;覃海兰 | 申请（专利权）人 | 康众（北京）生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 北京市商泰律师事务所 | 代理人 | 康众（北京）生物科技有限公司 |
| 地址 | 101111 北京市大兴区北京经济技术开发区科创六街88号院3号楼1010-A室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种利用高通量测序技术快速获得纳米抗体的方法，所述方法将流式细胞分选技术和高通量测序技术进行结合，其包括的步骤为：获得特定蛋白质W免疫和未免疫的羊驼外周血单个核细胞(PBMC)；采用流式细胞分选法获得针对特定蛋白质W特异的PBMC；提取未免疫、免疫后及分选后PBMC的总RNA，并反转录成cDNA；以所述的cDNA为模板，通过两步法PCR扩增获得抗特定蛋白质W的纳米抗体的DNA片段；构建纳米抗体的DNA片段的DNA文库，并进行高通量测序分析；分析所述纳米抗体的DNA片段的丰度；和将所述纳米抗体DNA片段的核苷酸序列构建入表达载体，并使所述纳米抗体DNA片段在合适的宿主中表达。 |
