一种对硝基苄基酯酶突变体及应用

基本信息

申请号 CN202110465504.0 申请日 -
公开(公告)号 CN113201516A 公开(公告)日 2021-08-03
申请公布号 CN113201516A 申请公布日 2021-08-03
分类号 C12N9/18;C12N15/55;C12P17/16 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 陈小龙;王广强;金晓;胡军;陆跃乐;张翼轸;朱林江;陈志钢;陈翰驰;田雯;朱俊峰 申请(专利权)人 安徽丰乐香料有限责任公司
代理机构 浙江千克知识产权代理有限公司 代理人 冷红梅
地址 230088 安徽省合肥市高新区天湖路一号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及其在酶催化dl‑‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型对硝基苄基酯酶在315位进行定点饱和突变获得。本发明的有益效果主要体现在:①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂,酶催化活性维持较高水平;②在无助溶剂体系下,突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应,并以10~200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物,进行水解拆分制备l‑薄荷醇,结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>70%,产物l‑薄荷醇的eep值>95%,表现出良好的工业应用性能。