多肽的制备方法

基本信息

申请号 CN202110554938.8 申请日 -
公开(公告)号 CN113025675A 公开(公告)日 2021-06-25
申请公布号 CN113025675A 申请公布日 2021-06-25
分类号 C12P21/02;C12P21/06;C07K14/605;C07K14/575;C07K14/635;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22;C07K1/18;C07K1/16 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 洪浩;詹姆斯·盖吉;肖毅;张娜;焦学成;赵军旗;王磊;孟翔宇;张慕姣 申请(专利权)人 凯莱英医药集团(天津)股份有限公司
代理机构 北京康信知识产权代理有限责任公司 代理人 金田蕴
地址 300457 天津市滨海新区经济技术开发区洞庭三街6号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种多肽的制备方法。该制备方法包括以下步骤:构建Sumo标签融合表达多肽基因的工程菌株,并诱导工程菌株可溶表达多肽;从工程菌株中纯化得到含有多肽前体的粗蛋白;对含有多肽前体的粗蛋白采用Ulp1蛋白酶进行酶切,切除Sumo标签;采用乙腈结合加热沉淀的方法或采用六氟异丙醇沉淀的方法纯化Ulp1蛋白酶的酶切产物,得到多肽。本发明建立了高效的基于可溶性重组表达药用多肽或其前体的技术,建立了基于一步沉淀纯化的简单纯化工艺,进一步的结合HPLC精制即可达到97%以上多肽纯度。