基因重组人胸腺素β4的制备方法

基本信息

申请号 CN201210149956.9 申请日 -
公开(公告)号 CN102660550A 公开(公告)日 2012-09-12
申请公布号 CN102660550A 申请公布日 2012-09-12
分类号 C12N15/12(2006.01)I;C12N15/16(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C07K14/575(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 侯增淼;高恩;李晓颖;李哲;赵金礼 申请(专利权)人 西安华澳丽康生物工程有限公司
代理机构 西安永生专利代理有限责任公司 代理人 申忠才
地址 710054 陕西省西安市雁塔区雁翔路西安交通大学科技园保赛大厦
法律状态 -

摘要

摘要 一种基因重组人胸腺素β4的制备方法,包括基因的获得、载体pPIC9K与I型人胶原蛋白和毕赤酵母电转化人胸腺素β4的连接、多拷贝插入重组子的筛选、基因重组人胸腺素β4融合蛋白毕赤酵母发酵、基因重组人胸腺素β4的纯化步骤。本发明利用人I型人胶原蛋白在毕赤酵母的高表达特性引导人胸腺素β4在毕赤酵母中稳定高效表达。在融合蛋白的I型人胶原蛋白前导肽与人胸腺素β4之间引入肠激酶切位点,避免了人胸腺素β4因为分子量较小,表达、纯化过程中所遇到的难题,增加了表达量,简化了纯化程序,提高了产品的提取纯化效率,可用于制备基因重组人胸腺素β4。