哺乳动物双基因高效筛选表达载体及其构建方法

基本信息

申请号 CN201510313438.X 申请日 -
公开(公告)号 CN104946687B 公开(公告)日 2018-09-14
申请公布号 CN104946687B 申请公布日 2018-09-14
分类号 C12N15/85 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 周海平;李红英;昝琰璐;王浛;卢薇;白义;白先宏 申请(专利权)人 北京精益泰翔技术发展有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 100176 北京市大兴区北京经济技术开发区荣京东街2号1幢406室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及生物制药技术领域,具体公开了哺乳动物双基因高效筛选表达载体及其构建方法;本发明涉及哺乳动物双基因高效筛选表达载体pGD、pGN,载体pGD携带GS和DHFR筛选基因,载体pGN携带GS和NEO筛选基因,同时在筛选基因前的SV40启动子中引入了缺失突变,实现筛选基因的转录弱化,而且所述载体与带有强启动子pEF‑1α的目的基因表达元件相连接,可快速筛选出高效表达目的蛋白的细胞株,为哺乳动物细胞中制备重组蛋白提供了新的工具。所述载体筛选高表达单克隆细胞,具有速度快、阳性克隆率高、目的蛋白表达量高等特点。