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检测CAR-T细胞CAR阳性表达率的荧光融合蛋白及其应用

基本信息

申请号	CN202111464981.1	申请日	-
公开（公告）号	CN114380904A	公开（公告）日	2022-04-22
申请公布号	CN114380904A	申请公布日	2022-04-22
分类号	C07K14/705（2006.01）I;C07K14/435（2006.01）I;C07K19/00（2006.01）I;C12N15/62（2006.01）I;C12N15/867（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;G01N33/68（2006.01）I;G01N15/14（2006.01）I	分类	有机化学〔2〕;
发明人	赵礼军;毛文超;李静静	申请（专利权）人	河南省华隆生物技术有限公司
代理机构	洛阳公信联创知识产权代理有限公司	代理人	李真真
地址	453000河南省新乡市新飞大道1789号高新区火炬园
法律状态	-

摘要

本发明涉及检测CAR‑T细胞CAR阳性表达率的荧光融合蛋白及其应用，属于生物医药技术领域，所述荧光融合蛋白是将CD19的部分片段与GFP进行融合，经过慢病毒转染于SupB‑1细胞中，使其再在表达WT型的CD19时，形成杂交型的CD19‑GFP蛋白，这种蛋白由于GFP的存在不能与CD81型成复合物，从而存在游离型的CD19‑GFP，用这种Sup‑B‑1细胞培养上清液与生产的CAR‑T细胞外的anti‑CD19‑scFv区进行结合，利用流式细胞仪进行488通道检测，从而能够对CAR‑T细胞CAR阳性率进行检测。与现有常用的PCR、WB、抗抗体/或荧光素酶标CD19‑流式技术，本技术无需对检测蛋白进行纯化，效率更高，成本更低。